VIII Congreso Internacional de Investigación REDU
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Publicado el 25 de abril de 2022 | http://doi.org/10.5867/Medwave.2022.S1.CI06
Estudio de expresión génica de factores de virulencia de Staphylococcus aureus causantes de bacteremia
Gene expression of virulence factors in clinical isolates of Staphylococcus aureus causing bacteremia
Kirsty Ximena Noboa Carrasco , Rodrigo Marcelo Grijalva Silva
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Palabras clave
Staphylococcus aureus, Factores de virulencia, Genes de referencia, PCR en tiempo real, Susceptibilidad a antibióticos
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Introducción
Staphylococcus aureus es uno de los principales causantes de infecciones diseminadas a través del torrente sanguíneo, infecciones que están asociadas con alta morbilidad y mortalidad. Las bacteremias asociadas a S. aureus (SABs) pueden ser complicadas, como aquellas que provocan complicaciones tromboembolíticas. Existen múltiples enfoques para el análisis de cepas virulentas, incluyendo genotipificación MLST y estudios de genoma completo. Sin embargo, los genes involucrados in vivo en la transición desde una bacteria posiblemente inocua a un patógeno altamente virulento no están definidos y se requieren más estudios para entender la patogénesis y posiblemente identificar cepas virulentas en estadios tempranos de infección, así como establecer medidas para prevenir dichas infecciones.
Objetivos
Estudiar la expresión de factores de virulencia de aislados clínicos de S. aureus causantes de SABs provenientes de dos hospitales de referencia de Quito, Ecuador.
Método
En primer lugar los aislados fueron estudiados para su susceptibilidad a los antibióticos como S. aureus sensibles (MSSA) o resistentes a la meticilina (MRSA) mediante un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa múltiple (PCR). El estudio de expresión de factores de virulencia se realizó por reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR). Los genes analizados fueron, factores de virulencia fhuD, fnbA, hla, sstD descritos en modelos in vitro y murino, junto con un gen asociado a la resistencia a fluoroquinolonas, gyr. Conjuntamente, se desarrolló el programa de qPCR, normalizando los factores de virulencia al gen de referencia 16S que demostró tener mayor estabilidad.
Principales Resultados
Se encontraron aislados que sobreexpresaron al menos uno o más de los genes propuestos. Además, destacó un aislado MRSA que sobreexpresó todo el set de factores de virulencia. Las proteínas asociadas a la expresión de fhuD, sstD y fnbA, se relacionan a estadios tempranos de bacteremia mientras que hla a cuadros con complicaciones tromboembolíticas. Se comparó la diferencia en la expresión de factores de virulencia entre aislados MSRA y MSSA, no se obtuvieron diferencias significativas entre virulencia y susceptibilidad a antibióticos. El aislado que sobreexpresó todos los genes de virulencia requiere posteriores estudios.
Conclusiones
En conclusión, el empleo de técnicas moleculares permite detectar la activación de genes no constitutivos que confieren a la bacteria ventajas de patogenicidad y diseminación en el huésped. Estos datos son de potencial importancia para la identificación de aislados de alta virulencia en infecciones nosocomiales y comunitarias.
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